HE染色結果判讀:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標準:(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍適度,透明潔凈,封裱美觀。讓您放心的實驗外包公司,專業(yè)HE染色實驗服務平臺。廣西專業(yè)的HE染色檢測
HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現(xiàn)在細胞質(zhì)與間質(zhì),染色優(yōu)良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟云南結果客觀的HE染色服務石蠟組織切片的HE染色。
HE染色注意事項:1.組織切片的脫蠟步驟應徹底,否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分,若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍色時應及時更換新液。 3.染色的時間長短需依據(jù):染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4.分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵,若分化失當則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復染后,組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。
HE染色常見問題:Q5:細胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍不足導致。應該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實驗步驟。科研常備實驗操作之HE染色。
HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太小;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,導致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進去,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯:需重新配置驗證。8)烤片時間短,切片上水分沒有烤干,也會導致著色不勻,出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。肺部組織HE染色如何觀察。新疆病理HE染色檢測
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HE染色堿染料染主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色。學上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色。廣西專業(yè)的HE染色檢測