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 免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry）又稱 免疫細(xì)胞化學(xué)。它是 組織化學(xué)的分支，它是用標(biāo)記的 特異性抗體（或抗原）對(duì)組織內(nèi)抗原（或抗體）的分布進(jìn)行組織和細(xì)胞原位檢測(cè)技術(shù)。 中文名 免疫組化技術(shù) 外文名 Immunohistochemistry 又    稱 免疫細(xì)胞化學(xué) 屬    于 組織化學(xué) 目錄 1 前言 ? 發(fā)展介紹 ? 技術(shù)分類 ? 標(biāo)記物 ? 應(yīng)用 2 免疫組織化學(xué) 免疫組化技術(shù)前言 編輯 免疫組化技術(shù)發(fā)展介紹 ——1941年 Coons 首先用 熒光素 標(biāo)記抗體—檢測(cè)肺組織內(nèi)的肺炎雙球菌獲得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶標(biāo)抗體技術(shù)——鐵蛋白標(biāo)記Ab技術(shù)。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技術(shù)，建立 辣根過氧化物酶——抗體過氧化物酶（***）技術(shù)，使免疫細(xì) 胞化學(xué)得到廣泛應(yīng)用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標(biāo)記法、 免疫電鏡 技術(shù)相繼問世。 上海免疫組化切片 不掉片，厚薄均勻找上海融享生物科技有限公司價(jià)格更低 服務(wù)更好。免疫組化公司電話

它的原理

根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理情況，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，較終通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。

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免疫組化。染色 免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)診斷、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過程中的質(zhì)控問題處理尤其重要［1］。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)......免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)診斷、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過程中的質(zhì)控問題處理尤其重要，隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都可以直接影響免疫組化結(jié)果。

    非特異性染色彌散性均勻）2．組織切片制作過程的影響①固定不良—非特異性染色，顯示不均。②邊緣干燥—非特異性染色（常見），加抗體時(shí)勿干片。3．人工假象與特異性結(jié)果顯示不在同一平面上。陽性對(duì)照：用已知抗原陽性的切片與待檢標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色。對(duì)照切片呈陽性結(jié)果，標(biāo)為陽性對(duì)照。陰性對(duì)照：用確證不含已知抗原的標(biāo)本作對(duì)照，應(yīng)呈陰性結(jié)果，稱陰性對(duì)照。其實(shí)這只是陰性對(duì)照中的一種，陰性對(duì)照還應(yīng)包括空白、替代、吸收和***實(shí)驗(yàn)。▲染色失敗的幾種原因：（1）所染的全部切片均為陰性結(jié)果，包括陽性對(duì)照在內(nèi)。全部（－）原因可能：①染色未完全嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行；②漏加一種抗體，或抗體失效；③緩沖液內(nèi)含疊氮化鈉，***了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)（2）所有切片均呈陽性反應(yīng)，原因可能是：①切片在染色過程中抗體過濃，或干燥了。②緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準(zhǔn)確，洗滌不徹底。③使用已變色的呈色底物溶液，或呈色反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)。④抗體溫育的時(shí)間過長(zhǎng)。⑤H2O2濃度過高，呈色速度過快。粘附劑太厚。（3）所有切片背景過深，原因可能是：①未加酶消化處理切片。②切片或涂片過厚。③漂洗不夠。免疫組化服務(wù)性價(jià)比高周期短。

染色免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過程中的質(zhì)控問題處理尤其重要［1］。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，都可以直接影響免疫組化結(jié)果，

【摘要】目的研究CEA免疫組化染色在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及環(huán)周切緣(CRM)侵犯方面的價(jià)值。方法選取經(jīng)纖維結(jié)腸鏡及病理證實(shí)為直腸*病人40例，應(yīng)用大組織切片技術(shù)對(duì)術(shù)后標(biāo)本處理，分別行常規(guī)染色及CEA免疫組化染色，比較分析兩種染色方法在檢測(cè)系膜微轉(zhuǎn)移及CRM侵犯方面的價(jià)值。結(jié)果CEA染色檢測(cè)**浸潤(rùn)程度大于常規(guī)病理染色，差異有性（t=5.2**<0.001）

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    （1）ABC復(fù)合物的制備：（2）ABC法反應(yīng)原理6．SP或SAP法（過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素或過氧化物酶標(biāo)記的堿性磷酸酶染色）Streptavidin/peroxidaseorstrepta-vidin/alkalinephosphatase）※該法是ABC法基礎(chǔ)上的進(jìn)一步改良，使卵白素與鏈霉（而非生物素）結(jié)合，而后再結(jié)合PO。它有4個(gè)亞基可與生物素結(jié)合，靈敏特異，背景低，成本低?，F(xiàn)在還有plus盒。優(yōu)點(diǎn)是：更簡(jiǎn)便，放大倍數(shù)↑，等電點(diǎn)中性更適合組織。分子量小，穿透力↑。7．蛋白A—金法（Protein—Agoldmethod）~多用于電鏡8．雙重組化染色法應(yīng)用雙重免疫組織化學(xué)可在同一張切片，同一細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)內(nèi)同時(shí)顯示兩種不同的抗原。9．免疫金—銀染色法（Immunogold—silverstainingIGSS）固定——見前述注意事項(xiàng)：1．固定劑的選擇：因組織而不同，注意質(zhì)量和性能。2．固定方式的選擇：①浸漬固定（參考文獻(xiàn)）②灌注固定（+后固定）③蒸汽固定免疫組化染色步驟（以ABC法為例）1．切片脫蠟入水，入PBS洗三次/15分鐘。2．封閉內(nèi)源性過氧化物酶。用新配置的（在PAS或—HCL緩沖液）室溫，30分鐘。3．水洗，入PBS，洗三次，每次5分鐘。4．減少非特異性著色用稀釋20倍的正常血清（產(chǎn)生二次抗體動(dòng)物血清?。?，室溫，30分鐘。免疫組化公司電話